Étude biochimique et microbiologique de l’effet in vivo et in vitro des huiles essentielles et de l’extrait méthanolique de la graine de Nigella sativa sur les maladies parodontales

Abstract

Une évaluation in vitro et in vivo a été réalisée sur l’efficacité de l’huile essentielle (HE) et d'extrait méthanolique (EM) des graines Nigella sativa L. (El habbah sauda, Sanouj) cultivées en Sahara Algérien (Adrar) contre les maladies parodontales. Le rendement d’extraction de l’HE et d’EM était de l’ordre de 0.45% et 10.9% successivement. Les analyses quantitatives montrent que la teneur en polyphénols totaux et flavonoïdes de l’EM est très élevée. La CCM a révélé que la catéchine, l'acide gallique et la quercétine sont probablement présents dans les deux extraits. Les résultats d’UPLC-SM ont confirmé la présence de plusieurs molécules bioactives dans l’extrait EM des groupes polyphenols et flavonoïdes. L'analyse des extraits, de broyat de la graine et des résidus d’extraction par la spectrométrie infrarouge à transformée de Fourier (IRTF) a détecté la présence de bandes d’absorption des groupement fonctionnels O-H, C-H des polyphénols, C=O et C-O des esters, N-H des amine et C-H des alcanes et des cycles aromatiques. Les résultats de CPG-SM ont confirmé l’efficacité de la technique d’entrainement à la vapeur pour extraire plus de 72% de thymoquinone de l’HE. Les analyses microbiologiques ont permis d’isoler onze bactéries à Gram positif, douze bactéries à Gram négatif et trois souches de levures microscopiques. Les résultats in vitro obtenus par micro-dilution montrent que 8250μg/ml en HE est la CMB contre S. epidermis, Lactobacillus sp. pendant 18 heures, les E. aerogenes, S. maltophilia , Porphyromonas sp. sont les plus sensible qu’à 16500μg/ml (HE) pendant 48 heures d’incubation tandis que Porphyromonas sp. (MBC: 31250μg/ml) et Proteus sp. (MBC: 62500μg/ml) étaient les plus sensibles à l’EM au bout de 24h. Cette efficacité n’était pas clairement visible par la méthode de diffusion sur agar. Les résultats de formulation des émulsions montre que 1.25% et 0.4% en tween 80 sont les proportions idéales pour la préparation des nanoémulsions (NEs) d’HE et d’EM respectivement de type huile dans l’eau dont NEsHE était la plus stable pendant 60 jours de conservation à 4°C. Les résultats in vivo ont montré une activité significative (P <0,05) de NEsHE pendant 21jours de traitement contre la flore totale des gingivites avec une réduction significative en indice de gingivite, indice de plaque (P <0,05) et une activité modérée contre l'indice d'hygiène buccale. L'HE et l’EM de la graine de N. sativa récoltées dans le sud Algérien ont montré une excellente activité contre les souches microbiennes isolées de la cavité buccale des malades parodontaux et l'étude in vivo a confirmé l'efficacité de NEsHE contre le biofilm buccal chez les gingivites.